| 作品名称： | 微生物学实验 |
| 作 者： | 郝晓冉 张萍 辛明秀 朱旭东 张全国 尹燕霞 贾晓会 |
| 出版单位： | 高等教育出版社 高等教育电子音像出版社 |
| 出版时间： | 2020年06月 |
| 策划编辑： | 王莉 |
| 责任编辑： | 赵君怡 |
| 技术编辑： | 赵莉 |
版权说明： |
本数字课程的专有出版权归高等教育出版社所有。未经出版者预先书面许可，任何单位和个人不得为任何目的、以任何形式或手段复制和传播本数字课程的任何部分，出版者保留一切法律追究的权利。 |
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微生物学实验
ISBN： 978-7-89510-815-8
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郝晓冉
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张萍
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郝晓冉 张萍 辛明秀 朱旭东 张全国 尹燕霞 贾晓会
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北京师范大学
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2020年06月
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高等教育出版社 高等教育电子音像出版社
微生物学实验是微生物学教学的重要组成部分，也是面向生物学专业学生的必修课程。课程通过原理讲解、实验操作和虚拟仿真3种形式呈现教学内容。学生通过学习可掌握微生物学基本实验操作技能，提高学生发现问题、解决问题能力，培养学生科研规范和科学素养的重要教学环节。本数字课程共分为13章，实验内容来源于优质实验课程及其长期教学积累，包括微生物培养基的配制、微生物无菌操作技术、微生物的分离、细菌和真菌形态的观察、微生物生理生化实验、利用16S rDNA序列鉴定细菌、丝状真菌基因组DNA的提取等内容。通过本课程的学习，学生不仅能够学习细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等常见微生物的分离、纯化、保藏、形态观察和分子鉴定技术，还能够学习电击转化、原生质体转化、农杆菌转化、CRISPR-Cas9基因编辑技术等微生物遗传改造方法。除此之外，还能够学习在实验室进行微生物小型发酵，了解如何利用微生物进行生物进化研究。
数字课程是将教学内容、教学活动、教学环境和教学服务有机结合的数字出版和应用形式。数字课程建设旨在通过丰富的教学资源、先进的技术手段和多维的教学环境，帮助教师在传承传统教学模式优势的基础上，更新教学理念、深化课程内容、改进教学方法、创新教学设计，促进学生自主学习和研究性学习，为优化教学管理和推进教学模式改革提供支持，从而全面提升课程教学的效率和质量。
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课程教师
郝晓冉
张萍
辛明秀
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| 内 容 咨 询： | 赵君怡 |
| 电 子 邮 箱： | zhaojy@hep.com.cn |
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| 技 术 咨 询： | 赵莉 |
| 电 子 邮 箱： | zhaoli@hep.com.cn |
| 电 话： | 010-58581431 |
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微生物学实验指导（第3版）
作者：辛明秀 黄秀梨
高等教育出版社
出版时间：2020-05
ISBN：978-7-04-052464-2
课程大纲
第1章
微生物培养基的配制
通过本次课的学习，使学生掌握天平的使用、高压蒸汽灭菌器的使用，掌握常用微生物培养基配制的一般方法和步骤。
1.1 微生物培养基的设计（实验理论）
1.2 微生物培养基的配制（实验理论）
1.3 牛肉膏蛋白胨培养基的配制和分装（实验操作）
1.4 斜面的制备（实验操作）
1.5 PDA培养基的配制和分装（实验操作）
1.6 高压蒸汽灭菌器的使用（实验操作）
1.7 电子天平的结构（虚拟仿真）
1.8 电子天平的使用（虚拟仿真）
1.9 高压蒸汽灭菌器的结构（虚拟仿真）
1.10 高压蒸汽灭菌器的使用（虚拟仿真）
第2章
微生物无菌操作技术
通过本次课的学习，使学生建立无菌操作概念，学习使用超净工作台，掌握常用实验耗材的包装、无菌平板的制备、各种无菌接种技术，并能够根据实验材料的差异选择不同的消毒和灭菌方法。
2.1 微生物无菌操作技术（实验理论）
2.2 常用实验耗材的包装（实验操作）
2.3 酒精棉球酒精灯的准备（实验操作）
2.4 超净工作台的结构（虚拟仿真）
2.5 无菌平板的制备（实验操作）
2.6 微生物接种技术（实验操作）
2.7 微生物接种技术（虚拟仿真）
第3章
微生物的分离
通过本次课的学习，使学生学习掌握土壤微生物、植物内生真菌的分离、纯化以及菌种保藏技术，能够根据样品特点设计微生物分离实验。
3.1 土壤微生物的分离（实验理论）
3.2 土壤微生物的分离（实验操作）
3.3 土壤微生物菌落形态观察（实验操作）
3.4 植物内生真菌的分离和培养（实验理论）
3.5 无菌平板和琼脂薄层培养基的制备（实验操作）
3.6 植物内生真菌的分离（实验操作）
3.7 植物内生真菌的纯化（实验操作）
3.8 载玻片湿室培养法观察真菌（实验操作）
3.9 植物内生真菌的菌种保藏（实验操作）
第4章
细菌形态的观察
通过本次课的学习，使学生认识细菌和放线菌，学习掌握显微镜的使用方法、细菌的革兰染色法、细菌芽孢的染色观察，了解插片法、玻璃纸法等放线菌观察方法。
4.1 细菌的革兰染色法（实验理论）
4.2 细菌的革兰染色法（实验操作）
4.3 细菌芽孢的染色观察（实验理论）
4.4 细菌芽孢的形态观察（实验操作）
4.5 放线菌的形态观察（实验理论）
4.6 插片法观察放线菌的形态（实验操作）
4.7 细黄链霉菌的显微观察（实验操作）
4.8 玻璃纸法观察细黄链霉菌（实验操作一）
4.9 玻璃纸法观察细黄链霉菌（实验操作二）
4.10 显微镜的使用（实验操作）
第5章
真菌形态的观察
通过本次课的学习，使学生认识酵母和霉菌，学习用染色方法观察酵母细胞的死活；学习掌握酵母菌假菌丝、荚膜、子囊孢子的培养观察方法，理解酵母菌这些结构的生物学意义；学习载玻片湿室培养法培养观察霉菌，了解常见霉菌青霉、曲霉、毛霉、根霉的菌丝和产孢结构。
5.1 酵母菌假菌丝的观察（实验理论）
5.2 白色念珠菌假菌丝的形态观察（实验操作）
5.3 酿酒酵母死活细胞的鉴别（实验操作）
5.4 酿酒酵母子囊孢子的观察（实验操作）
5.5 新型隐球酵母荚膜的观察（实验操作）
5.6 常见霉菌的形态观察（实验理论）
5.7 常见霉菌的形态观察（实验操作）
第6章
微生物生理生化实验
通过本次课的学习，掌握细菌鉴定中常用的生理生化反应实验原理及方法，了解生理生化反应在细菌鉴定中的重要作用；了解纤维素降解真菌的快速筛选方法，理解微生物在环境物质和能量循环过程中所发挥的重要作用。
6.1 V-P反应和甲基红试验（实验操作）
6.2 吲哚实验（实验操作）
6.3 糖发酵试验（实验操作）
6.4 纤维素降解菌的筛选（实验操作）
第7章
利用16S rDNA序列鉴定细菌
通过本次课的学习，使学生学习利用16S rDNA序列对细菌进行鉴定及系统发育分析的原理和方法；掌握细菌基因组DNA提取方法、PCR原理和方法、琼脂糖凝胶电泳技术；了解16S rDNA序列鉴定细菌的优势和局限性。
7.1 利用16S rDNA序列鉴定细菌（实验理论）
7.2 利用试剂盒提取细菌基因组DNA（实验操作）
7.3 DNA的琼脂糖凝胶电泳检测（实验操作）
7.4 PCR扩增16S rDNA序列（实验操作）
第8章
丝状真菌基因组DNA的提取
通过本次课的学习，学习并理解丝状真菌细胞结构，掌握冷冻干燥机的使用方法，了解丝状真菌基因组提取的一般流程和步骤。
8.1 真空抽滤（实验操作）
8.2 冷冻干燥机的使用（实验操作）
8.3 液氮研磨菌丝（实验操作）
8.4 丝状真菌基因组DNA的提取（实验操作一）
8.5 丝状真菌基因组DNA的提取（实验操作二）
8.6 丝状真菌基因组DNA的提取（实验操作三）
第9章
细菌转化和细菌-噬菌体协同进化
通过本次课的学习，学生掌握微生物遗传改造经常使用的大肠杆菌转化方法，理解相关的实验原理。同时了解利用模式微生物进行实验进化研究方法。
9.1 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（实验理论）
9.2 分光光度计的使用（实验操作）
9.3 细胞扩大培养（实验操作）
9.4 大肠杆菌感受态细胞的制备（实验操作）
9.5 转化（实验操作）
9.6 菌落培养和平板筛选（实验操作）
9.7 细菌-噬菌体协同进化（实验理论）
第10章
三亲结合法转化蓝细菌
通过本次课的学习，让学生了解蓝细菌的培养方法和基因工程的相关技术与方法，理解和掌握三亲结合法转化蓝藻的实验设计理念和操作技术。
10.1 蓝细菌的培养（实验理论）
10.2 三亲结合法转化蓝细菌（实验理论）
10.3 运载质粒菌和接合辅助菌的准备（实验操作）
10.4 蓝藻的准备（实验操作）
10.5 藻菌混合、涂平板及筛选（实验操作）
第11章
真菌常用遗传转化方法
通过本次课的学习，使学生了解真菌细胞壁的结构，理解原生质体的形成过程，学习和掌握丝状真菌原生质体转化的一般方法和步骤。
11.1 孢子悬液的制备（实验操作）
11.2 原生质体的制备（实验操作）
11.3 PEG介导的原生质体的转化（实验操作）
11.4 酿酒酵母点击转化（实验理论）
第12章
新型隐球酵母小RNA的提取和电泳
12.1 新型隐球酵母小RNA的提取和电泳
第13章
微生物发酵工程技术及其应用
通过本次课的学习，了解微生物发酵工程原理、工艺和流程，学习掌握酸奶发酵方法，了解乳酸菌生长特点。
13.1 微生物发酵工程技术及其应用（实验理论）
13.2 酸奶的制作（实验操作）